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上海信帆明星产品:黄曲霉毒素总量(Aflatoxin Total)ELISA 检测试剂盒​​​​​​​

人阅读 发布时间:2020-07-17 15:39

上海信帆明星产品:黄曲霉毒素总量(Aflatoxin Total)ELISA 检测试剂盒

上海信帆生物供应
黄曲霉毒素总量(Aflatoxin Total)ELISA 检测试剂盒,产品质量稳定,灵敏度高,效果好,适用于实验室检测,也可以用于农场,饲料混合车间等测定,大家欢迎随时咨询


黄曲霉毒素总量(Aflatoxin Total)ELISA 检测试剂盒说明书

【概要】
黄曲霉毒素是一类真菌(主要是黄曲霉和寄生曲霉)代谢 的有毒产物,主要存在于谷物,坚果,棉籽以及一些与人类血 液,动物饲料相关的产品中。黄曲霉毒素以 AFB1、AFB2、 AFG1 和 AFG2这四种毒素为主,黄曲霉毒素总量一般是指这 四种毒素的总量。它们是 I 类致癌物,被证明对人和动物的肝 脏、肾脏等组织和器官具有很大的危害,是一类毒性很强的致 癌物质。因此,必须对其进行及时检测监控,目前主要的检测 手段是高效液相色谱法(HPLC)。
本产品是基于免疫竞争法检测原理建立的一种快速定量 检测黄曲霉总量(Aflatoxin Total,AFT)的试剂盒。它具有简单、 快速,无需特殊仪器设备等优势,既可以用于实验室检测,也 可在农场、饲料混合车间等进行实地测定。
【适用范围】
本试剂盒可定性、定量检测米、面、油、坚果、辣椒等粮 油及其加工产品和饲料中的黄曲霉毒素总量。
【试验原理】
本测试盒采用固相酶联免疫吸附 ELISA 原理,通过抗 黄曲霉毒素抗体与酶标抗原、待测抗原的竞争免疫反应以 及酶的催化显色反应相结合来检测 AFT,样本吸光值与其 所含 AFT 的含量成负相关,对照标准曲线,再乘以其对应的 稀释倍数,即可得出样品中 AFT 的含量。
【试剂盒组成】
1. 96 孔板(8 孔*12 条)
2. AFT 标准溶液×5 瓶:(1.5mL/瓶)
0 ng/mL,0.1ng/mL,0.25 ng/mL, 0.75 ng/mL, 2.5 ng/mL
3. AFT 酶标抗原 1 瓶.........................................................6mL
4. 底物液 1 瓶......................................................................6mL
5. 显色液 1 瓶......................................................................6mL
6. 终止液 1 瓶......................................................................6mL
7. 浓缩洗涤液 (20×)1 瓶............................................20mL
8. AFT 浓缩样品稀释液 (10×) 1 瓶...........................20mL
注:48 孔型号试剂盒内容物数量、体积略有差别。
【需要而未提供的设备和试剂】
----酶标仪 450nm
----振荡器
----离心机
----粉碎机
----天平:感量 0.01g
----微量移液器:单道 20L~200L、100L~1000L
----甲醇
----石油米或正己烷
----去离子水
注:以上仪器均可代购
【试剂配制】
洗涤工作液: 将浓缩洗涤液用去离子水按 1:19 体积比进行 稀释(1 份浓缩洗涤液+19 份去离子水)。
样品稀释液Ⅰ: 将 AFT 浓缩样品稀释液用去离子水按 1:9 体积比进行稀释(1 份浓缩样品稀释液+9 份去离子水)。
样品稀释液Ⅱ:1.5mL 甲醇+8.5mL 样品稀释液Ⅰ。 70%甲醇-水:取无水甲醇,用去离子水按 7:3 体积比例稀释 (7 份无水甲醇+3 份水)
【样本前处理步骤】
一、玉米、大米、麦类等谷物处理方法(稀释倍数:20 倍)
1. 取 5.0g 粉碎好的样品,加入 25mL 70%甲醇-水,混匀;
2. 充分振荡 15min 后过滤或 4000rpm 离心 5-10min;
3. 将滤液或上清液用样品稀释液Ⅰ以 1:3 稀释(例:0.5mL 滤液+1.5mL 样品稀释液Ⅰ),充分混匀后即为待测样液;
4. 移取该液 50uL 进行检测。
二、花生、食用油、豆类等处理方法(稀释倍数:20 倍)
1. 取 5.0g 粉碎好的样品或称取 5.0g 油样,加入 25mL 70%甲 醇-水和 20mL 石油mi或正己烷,混匀;
2. 充分振荡 15min 后过滤于分液漏斗中,静止分层;
3. 取下层甲醇水提取液,用样品稀释液Ⅰ以 1:3 稀释(例: 0.5mL 滤液+1.5mL 样品稀释液Ⅰ),充分混匀后即为待
测样液;
4. 移取该液 50uL 进行检测。
三、酱油、醋等处理方法(稀释倍数:20 倍)
1. 取 5.0g 样品,加入 25mL 70%甲醇-水,混匀;
2. 充分振荡 15min 后过滤或 4000rpm 离心 5-10min;
3. 将滤液或上清液用样品稀释液Ⅰ以 1:3 稀释(例:0.5mL 滤 液+1.5mL 样品稀释液Ⅰ),充分混匀后即为待测样液;
4. 稀释后的待测样液需 pH 值约 7.0 左右,移取该液 50uL 进 行检测。
四、麸皮等饲料原料处理方法(稀释倍数:40 倍)

1. 取 5.0g 粉碎好的样品,加入 50mL 70%甲醇-水,混匀;
2. 充分振荡 15min 后过滤或 4000rpm 离心 5-10min;
3. 将滤液或上清液用样品稀释液Ⅰ以 1:3 稀释 (例:0.5mL 滤液+1.5mL 样品稀释液Ⅰ),充分混匀后即为待测样液;
4. 移取该液 50uL 进行检测。
五、浓缩或配合饲料等处理方法(稀释倍数:20 倍)
1. 取 5.0g 粉碎好的样品,加入 25mL 70%甲醇-水,混匀;
2. 充分振荡 15min 后过滤或 4000rpm 离心 5-10min;
3. 将滤液或上清液用样品稀释液Ⅰ以 1:3 稀释 (例:0.5mL 滤液+1.5mL 样品稀释液Ⅰ),充分混匀后即为待测样液;
4. 稀释后的待测样液需 pH 值约 7.0 左右,移取该液 50uL 进 行检测。
注意:若样品中 AFT 偏高,建议将样品提取液先用样品稀释 液Ⅰ以 1:3 稀释,再用样品稀释液Ⅱ进一步稀释后检 测。


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