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上海信帆信帆:脱氧雪腐镰刀菌烯醇酶免检测试剂盒

人阅读 发布时间:2020-07-21 11:37

脱氧雪腐镰刀菌烯醇酶免检测试剂盒真的特别好用

上海信帆生物供应脱氧雪腐镰刀菌烯醇酶免检测试剂盒,该产品是我司明星产品,深受广大科研用户青睐,质量稳定,大家可随时咨询!

脱氧雪腐镰刀菌烯醇酶免检测试剂盒,试剂盒采用固相酶联免疫间接竞争法测定脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON,又称呕吐毒素),适用于玉米、大麦、小麦等谷物及其制品,饲料及其原料中玉米赤霉烯酮的快速筛查,分析时间小于1小时。

【适用范围】 本试剂盒可定性、定量检测小麦、面粉等谷物及其加工制 品和饲料中的呕吐毒素

【样本前处理步骤】

一、面粉、小麦等谷物及其加工制品(稀释倍数:10) 1. 取 5.0g 粉碎好的样品,加入 25mL 去离子水,混匀; 2. 充分振荡 15min 后过滤或 4000rpm 离心 5-10min; 3. 取 500μL 滤液或上清液加 500μL 样品稀释液(试剂盒中 提供),充分混匀后即为待测样液; 4. 移取该液 50uL 进行检测。

二、麸皮、豆粕等(稀释倍数:10) 1. 取 5.0g 粉碎好的样品,加入 25mL 去离子水,混匀; 2. 充分振荡 15min 后过滤或 4000rpm 离心 5-10min; 3. 取 500μL 滤液或上清液加 500μL 去离子水,充分混匀后 即为待测样液; 4. 移取该液 50uL 进行检测。

 

三、玉米粉、鸡料、鸭料、猪料等(稀释倍数:10) 1. 取 5.0g 粉碎好的样品,加入 25mL 去离子水,混匀; 2. 充分振荡 15min 后过滤或 4000rpm 离心 5-10min; 3. 取 500μL 滤液或上清液加 500μL 20%甲醇-水,充分混匀 后即为待测样液; 4. 稀释后的待测样液需 pH 值约 7.0 左右,移取该液 50uL 进 行检测。

注意事项:

1. 试剂及样本没有恢复到室温(20~25℃)会导致所有标准 的 OD 值偏低。

2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准 曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应 立即进行下一步操作。

3. 每种试剂使用前均需摇匀。

4. 反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。

5. 不要使用过了有效期的试剂盒;也不要掺杂使用过了有 效期的试剂盒;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6. 储存条件:试剂盒保存于 2~8℃,不能冷冻,将不用的 微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏 感,因此要避光保存。 7. 试剂变质的迹象:显色试剂有任何颜色表明显色剂变质, 应当弃之。0 标准的吸光度(450/630nm)值小于 0.5 (A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。

8. 对玻璃器皿和DON溶液消毒好用次lv酸钠(10%,v/v) 溶液浸泡过夜。

9. 该试剂盒采用室温反应(20~25℃),当反应温度高于 25℃或者低于 20℃时,均需相应缩短或延长反应时间, 具体可咨询

【概要】

呕吐毒素(Vomitoxin),化学上称作脱氧腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),属于霉菌的单端孢菌素族,具有很高的细胞毒性及免疫抑制性质,是由几种粉色镰刀霉真菌属产生的。玉米中最容易产生这种毒素。呕吐毒素在小麦、玉米以及稻米中的含量通常是mg/kg级。DON属于剧毒或中等毒物,人畜摄入了被DON污染的食物/饲料后,会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状,严重时损害造血系统造成死亡。研究表明,DON可能对免疫系统有影响,有明显胚胎毒性和一定致畸作用,可能有遗传毒性,但无致癌、致突变作用。谷物及饲料中DON的含量有严格的限量标准。我国谷物中DON 的限量标准为1.0 mg/kg 。HPLC或GC-MS用作检测呕吐毒素的方法,但是其前处理步骤繁琐,费用昂贵。酶联免疫检测试剂盒则可经济、快速地检测呕吐毒素。

 

【试验原理】

  呕吐毒素检测试剂盒又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇检测试剂盒,本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被呕吐毒素抗原,样本中呕吐毒素和此抗原竞争结合抗呕吐毒素抗体(抗试剂),同时抗呕吐毒素抗体与酶标二抗(酶标物)相结合,经TMB底物显色,样本吸光值与其所含呕吐毒素的含量成负相关,对照标准曲线,再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中呕吐毒素的含量。

 

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