总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(NBT 核黄素微板法)的产品简介
产品简介：
超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD)是含金属辅基的酶，能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2)，是生物体内一种重要的抗氧化酶，由于超氧自由基是不稳定的的自由基，寿命极短，SOD 活性一般用间接方法测定，并利用各种呈色反应来测定 SOD 活力，其中显色剂有 NBT(唑蓝四氮)、WST-1、WST-8 等。总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(NBT 核黄素微板法)是一种基于 NBT 的光还原反应，所以又称作 NBT 光还原法，检测原理是在有氧化物质存在下核黄素被光还原，在有氧条件下，被还原的核黄素极易再氧化产生超氧阴离子自由基(O2.-)，O2.-可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在 560nm处有强吸收，而 SOD 可清除超氧阴离子(O2.-)，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明 SOD 活性愈低，反之酶活性愈高，据此通过酶标仪比色分析就可以计算出样品中总超氧化物岐化酶活性水平。本方法是利用 SOD 抑制 NBT 在光照下的还原作用来确定酶活性大小，可用于检测植物、组织、细胞、血清或其它样品中 SOD 活性。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
自备材料：
1、生理盐水或 PBS
2、电子天平、剪刀、低温冰箱或制冰机、冰袋、匀浆器或研钵、离心机、离心管、小试管、 光照培养箱光源或 40W 荧光灯或日光灯、测光仪(照度计)、酶标仪、96 孔板
注意事项：
1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。待测样品-70℃可保存 1 个月，需注意反复冻融会导致 SOD 部分失活。
2、 植物中的多酚类物质会引起酶蛋白不可逆沉淀，使酶失去活性，因此在提取 SOD 酶时，必须添加多酚类物质的吸附剂，将多酚物质除去，避免酶蛋白变性失活。SOD 提取试
剂含有 PVP 等成分，可有效去除多酚类物质。SOD 提取试剂不够用可以用磷酸钠缓冲液(0.05M,pH7.8)替代。
3、 细胞或组织等样品制备时，不能采用含有 Triton X-100 等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。
4、 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如 0.1mM ascorbic acid，5mM GSH 都
会使测定出来的吸光度显著升高。
5、 对于植物样品，研磨处理应迅速，以免 SOD 酶活下降，尽量在冰浴条件下处理。
6、 如果用分光光度计，比色杯光径应为 1cm，加入的上清及试剂量应根据比色杯的最小
要求体积而定。
7、 所用离心管或 96 孔板应洁净透明，透光性好。
8、 一般要求各孔受光情况一致，所有反应管应排列在与日光灯灯管平行的直线上。
9、 反应温度控制在 25℃，视酶活性高低适当调整反应时间；温度较高时，光照时间应缩
短；温度较低时，光照时间相应延长。
10、 如果无 4000Lx 日光，可 200W 在 10~12cm 处，照射 20min；超净工作台 5cm 处光强约 800~1000Lx，,照射 30~40min；强太阳光下一般光强可达 30000Lx，照射 5~15min，一般不建议直接用太阳光。
11、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6 个月有效，4℃运输和保存。

总超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒(NBT 核黄素微板法)的产品简介​​​​​​​