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 尿酸(UA)检测试剂盒(磷钨酸比色法)的操作步骤

人阅读 发布时间:2023-11-30 10:13

 尿酸(UA)检测试剂盒(磷钨酸比色法)的操作步骤
 
产品简介:
尿酸(UA)是人体和动物的代谢产物,正常人体尿液中产物主要为尿素,含少量尿酸,尿
酸高是人体的嘌呤因代谢发生紊乱,致使血液中尿酸增多而引起的一种代谢性疾病,体内尿
酸每日的生成量和排泄量大约是相等。
尿酸(UA)检测试剂盒(磷钨酸比色法)检测原理是样本中的尿酸在碱性条件下被磷钨酸
氧化为尿囊素和二氧化碳,磷钨酸被还原成蓝色化合物——钨蓝,钨蓝生成量与尿酸含量呈
正比,通过分光光度计测定 600~660nm 吸光度,根据标准曲线求得 UA 含量,该试剂盒
可用于检测无溶血、无乳糜的血清样本中尿酸的含量。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于
临床诊断或其他用途。
产品组成:

自备材料:
1、蒸馏水或生理盐水
2、离心管或小试管、离心机
3、分光光度计、比色皿
操作步骤(仅供参考):
1、准备样品:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如待测样本浓度
过高,可用蒸馏水或生理盐水稀释后检测,-20℃冻存。
2、配制 UA 工作试剂:按 UA Assay Buffer:UA 促进剂=50:1 的比例混合,即成;4℃
保存 24H 有效。
3、UA 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的 UA 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

5、UA 检测:充分混匀,室温放置 5min,空白管调零,分光光度计测定 630nm 处标准
管、测定管的吸光度(记为 A 标准、A 测定)。
计算:
血清(浆)尿酸(μmol/L)=(A 测定/A 标准)×400
式中:A 测定=测定管的吸光度
A 标准=标准管的吸光度
400=尿酸标准(400μmol/L)
参考区间:

注意事项:
1、 测定各孔时各孔温度均需达到室温,否则影响结果。
2、 红细胞内存在多种非特异性还原物质,所以用血清或血浆测定比用全血好。
3、 不宜用草酸钾作为抗凝剂。
4、 显色后需准时测定,放置时间过长易变浊。
5、 血清和尿液样品中的尿酸室温下可稳定 3 天,尿液样品冷藏后,可引起尿酸盐沉淀,可调节 pH 值至 7.5~8.0,并将样本加热至 50℃,再行测定。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6 个月有效;4℃运输,4℃保存。
附录:参考标准曲线范围:测定尿酸标准在 400μmol/L 时,通过酶标仪测定其630nm 吸光度多在 0.1~0.3 之间。测定尿酸标准在 50、100、200、400、600、800μmol/L 时吸光度,据此 作出其标准曲线如下:
注意:由于检测仪器和操作手法等条件的不同,参考值范围会有波动,该值仅供参考,对于要求计算含量的,可进行多点测定;根据 测定经验显示标准品浓度在 25μmol/L 以下,标准品浓度在 600μmol/L 以上,标准曲线会有偏差。
 
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