小鼠白细胞介素 4（IL-4）ELISA检测试剂盒检测原理

小鼠白细胞介素 4（IL-4）ELISA检测试剂盒检测原理

检测原理

试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠白细胞介素 4（IL-4）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠白细胞介素 4（IL-4）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂盒性能

1.  准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2.  灵敏度：检测浓度小于 1.0 pg/mL。

3.  检测范围：5 pg/mL - 160 pg/mL 。

4.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

5.  重复性：板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。

6.  贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

7.  有效期：6个月

小鼠白细胞介素 4（IL-4）ELISA检测试剂盒检测原理